Muzej Semberije se nalazi u najstarijoj zgradi u Bijeljini i sadrži četiri izložbene sale, uključujući i jednu za povremene izložbe. Muzej je otvoren svakodnevno, a poseduje tri stalne izložbe.
U prizemlju muzeja, se nalazi arheološka izložba koja obuhvata artefakte od neolita do kasnog srednjeg veka. Posebno je značajna kolekcija srednjovekovnih natpisa na staroslovenskom jeziku srpske redakcije, koja sadrži 23 ćirilična natpisa.
Muzej čuva i bogatu kolekciju rimskih kamenih spomenika uključujući Jupiterov žrtvenik, kameni posude, figure lava, stelu i statuete. Etnološka izložba bavi se narodnim životom sela Semberije i starogradskom kulturom Bijeljine. Ova postavka prikazuje predmete koji su bili deo svakodnevnog života u ovim područjima.
Istorijska izložba pruža pregled istorije Bijeljine od prvog pominjanja 3. marta 1446. godine do 20. veka. Ova izložba obuhvata fotografije starih građevina u Bijeljini, staro naoružanje i druge značajne predmete iz prošlosti grada.